Alguns resultados científicos são duros de manchar, especialmente na pesquisa genética. Frequentemente os cientistas são incapazes de ver fisicamente se o gene que introduziram em uma pilha produziu o traço desejado. Para superar este problema os investigadores usam os vários sinais genéticos que contêm as partes de ADN extrangeiro a que causar a pilhas, por exemplo, o fulgor quando expor à luz ultravioleta.
Mas os cientistas no laboratório do membro Rudolf Jaenisch de Whitehead não tiveram que recorrer a estes sinais genéticos em sua experiência mais atrasada porque os resultados eram fáceis de considerar. O edifício em seu papel extensamente divulgado da natureza de junho, que demonstraram que é possível converter especializou células epiteliais do rato em pilhas de haste unspecialized, investigadores postdoctoral Alexander Meissner de Whitehead e Mário Wernig tem identificado agora pilhas com sucesso reprogrammed por olhares sozinho. |
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Seus resultados, que aparecem em linha na biotecnologia da natureza do jornal, trazem a terapias de pilha humanas da haste uma etapa mais perto da realidade. Antes de reprogramming pode ser aplicado a nossa própria espécie para gerar pilhas de haste embrionárias feitas sob encomenda, cientistas deve poder realizá-la sem alterar o ADN das pilhas envolvidas.
“Isto elimina um dos obstáculos principais a reprogramming pilhas humanas,” diz Jaenisch, que é igualmente um professor do MIT da biologia. “Se nós superamos os outros obstáculos, esta aproximação poderia um dia fornecer pilhas de haste embrionárias humanas feitas sob encomenda para o uso na terapia.”
A primavera passada, Wernig e Meissner confiaram em sinais genéticos para identificar pilhas com sucesso reprogrammed. Isto exigiu-os trabalhar com fibroblasto de um rato genetically modificado. O rato foi crescido das pilhas de haste embrionárias que contiveram a codificação extrangeira do ADN para a resistência antibiótica. Os cientistas tinham introduzido estratègica estes ADN extrangeiro “marcadores” em pontos particulares ao longo do genoma, ao lado dos genes expressados somente em pilhas de haste embrionárias. Todas as pilhas (que incluem fibroblasto) no rato resultante contiveram os marcadores.
Na experiência original, os investigadores tomaram fibroblasto da cauda deste rato e contaminaram-nos com um vírus especial que contem quatro genes (4 de outubro, Sox2, c-myc, e Klf4) capazes de converter as pilhas a um estado embrionário. Os genes tipicamente ativos em pilhas de haste embrionárias rujiram à vida, provocando o ADN extrangeiro adjacente para fornecer a resistência antibiótica. Assim somente as pilhas inteiramente reprogrammed sobreviveram à exposição a um antibiótico, que permitisse que os cientistas os isolassem.
“Quando nós conduzimos a experiência original, nós observamos que muitas das pilhas contaminadas tinham começado já deformar antes que os marcadores estiveram ativados,” dizem Wernig.
Assim setup uma experiência nova para testar se a identificação visual sozinho trabalharia. Certamente, podiam separar as pilhas reprogrammed dos fibroblasto ordinários sob um microscópio, baseado em diversas diferenças físicas. Os fibroblasto são grandes e lisos. As pilhas de haste embrionárias são colônias apertadas pequenas, redondas e do formulário.
“Nós mostramos que não há nenhuma necessidade de usar marcadores para isolar pilhas com sucesso reprogrammed,” dizemos Meissner. “Isto simplifica significativamente esta aproximação nos ratos, como nós podemos agora trabalhar com fibroblasto ordinários.”
Mas um outro obstáculo permanece antes que a técnica possa ser aplicada às pilhas humanas.
“Nós ainda usamos os vírus que contêm o ADN extrangeiro para introduzir os genes que induziram reprogramming,” explicamos Meissner.
Os cientistas estão trabalhando agora para eliminar o vírus do processo reprogramming. Jaenisch acredita que sucederão eventualmente e indic que a técnica poderia eventualmente render uma fonte beneficiente de pilhas de haste embrionárias humanas feitas sob encomenda para o uso na terapia.
Meissner e Wernig reprogrammed com sucesso aproximadamente 0.5 por cento dos fibroblasto. Dado que há uns milhões das pilhas em uma biópsia típica da pele (pele usada investigadores da extremidade da cauda ou da orelha do rato), isso traduz em milhares de pilhas de haste, cada uma capaz de tornar-se qualquer tipo da pilha do corpo.
Escrito por Eric Agradável
Citação cheia:
Biotecnologia da natureza, edição em linha, 27 de agosto de 2007
“Reprogramming direto de fibroblasto Genetically Unmodified em pilhas de haste de Pluripotent”
Alexander Meissner (1*), Mário Wernig (1*) e Rudolf Jaenisch (1.2)
os autores *These contribuíram ingualmente a este trabalho.
(1) instituto de Whitehead para a pesquisa biomedicável, departamento de Cambridge, Massachusetts (2) da biologia, Instituto de Tecnología de Massachusetts, Cambridge, Massachusetts
Fonte: Ceal Capistrano
Instituto de Whitehead para a pesquisa biomedicável |
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